8883net新葡新京生物首创“二抗组合”解决Co-IP实验轻重链干扰难题

CO-IP神器一只抗重链or轻链的二抗

细胞的体外培养何时用瓶皿培养，何时用孔板培养？

在细胞体外培养中，培养瓶皿和孔板的选择主要取决于实验目的、细胞数量需求、处理条件数量以及后续检测方法等因素。以下是两者的典型应用场景和选择依据：1. 培养瓶/皿

常用的RNA酶抑制剂

1. 焦磷酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的 RNA 酶抑制剂。它通过和 RNA 酶的活性基团组氨酸的咪 唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。2.

防止RNA酶污染的措施

1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于 180℃的高温下干烤 6hr 或更长时间。2. 塑料器皿可用 0.1% DEPC 水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可

克隆 PCR 产物的最优条件是什么？

最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比 1：8 或 8：1 也行。应测 定比值范围。连接用 5uL 2X 连接液， 50n

PCR污染与对策

PCR 反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 污染原因        (一)标本间交叉

PCR出现片状拖带或涂抹带的原因及对策

PCR 扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差，dNTP 浓度过高， Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对

PCR出现非特异性扩增带的原因及对策

PCR 扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特 异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、 或

PCR的假阴性，不出现扩增条带

PCR 反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量 ④PCR 循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。        模板：①模

PCR 产物的电泳检测时间

一般为 48 h 以内，有些最好于当日电泳检测，大于 48 h 后带型不规则甚致消失。

PCR 引物设计黄金法则

1.引物最好在模板 cDNA 的保守区内设计。 DNA 序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在 NCBI 上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析 软

真核细胞 DNA 的制备与定量

制备基因组 DNA 是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于 100-200kb。在 DNA 提取过程中应尽量避免使 DNA 断裂和降