
【储存条件】 -20˚C保存,为了保持产品的最佳状态,推荐进行分装保存,避免反复冻融过程。
【产品简介】
本产品含有6个可自发光的纯化蛋白质,分子量介于23至117kD之间,且均携带有能被小鼠、兔子及山羊等多种抗体所识别的基团。当进行化学发光(ECL)检测时,6个蛋白质由于结合了相应的抗体,也可以发光,从而达到自发光的效果。本产品发出的光与目的蛋白质条带发的光一样,可以通过X光胶片曝光或者ECL发光成像仪进行检测。
此外,本产品可提供精确的分子量标准(6个蛋白质中的5个都经过质谱的鉴定),也可用于监控一抗、二抗的反应进程及ECL过程,并且便于在ECL后直接比较目标条带的大小。
【适用范围】 可用于Western Blot实验;确定未知蛋白质的分子量范围;监控一抗、二抗的孵育效果以及ECL等检测步骤的质量。
【操作示例】
1.室温融化、混匀后可以在SDS-PAGE胶中直接上样。本产品的使用量一般5μL即可。也可根据您使用胶的厚度、上样孔的宽度、一抗和二抗的种类、滴度以及ECL液的灵敏度等相关因素进行适当的调整,一般在2-10μL之间。
2.本产品可与本公司的预染Marker一起使用,更有利于全程监控Western Blot所有环节。
注:同一个泳道上两种Marker时,最好先将两种Marker在离心管中匀混后,再上样。如此操作,Marker的条带会更漂亮。
3.转膜后,进行正常的封闭、一抗和二抗孵育,最后进行ECL发光检测。
4.ECL后,可以同时检测到6个自发光条带和目的条带(如下图所示)。
【注意事项】
1.在使用前,需要将Marker从低温环境中取出,并在室温下平衡至完全溶解。这一步骤无需加热,也无需添加任何试剂。
2.在观察结果时,需要注意Marker的条带是否清晰、是否与目标蛋白的条带对应。如果出现条带缺失或模糊的情况,可能是由于Marker使用量过多、曝光时间过长、抗体浓度过高等原因造成的。此时,可以尝试调整这些参数以获得更好的结果。
