【储存条件】 -20˚C。
【产品简介】
Nb.BsrDI是一种高特异性切刻内切酶，能够识别双链DNA（dsDNA）的特定位点，并仅切割其中一条链，在dsDNA上产生单链切口，而不会完全切断双链结构。这种独特的单链切割特性使其成为DNA修饰、链置换扩增及单链操作实验中的理想工具，广泛应用于基因编辑、等温扩增、纳米技术研究及DNA纳米结构组装等领域。
【识别位点】
【产品组分】
【适用范围】 DNA甲基化分析；DNA修复研究；DNA修复研究。
【操作示例】
a. 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：
* DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响Nb.BsrDI酶活性。
b. 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴；
c. 65℃温育30min~1h；
d. 80℃温育20min即可使酶失活，停止反应，或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
【甲基化修饰影响】
【活性定义】 1活性单位（U）是指在50μL反应体系中，65℃ 1h内完全将1µg的超螺旋pUC19 DNA转化成开环形式所需的酶量。
【质量控制】
1. 超长时间温育检测：
将10U Nb.BsrDI与超螺旋pUC19 DNA底物在65℃温育16h，通过琼脂糖凝胶电泳检测开环DNA无变化。
2. RNase残留检测：
将10U Nb.BsrDI与500ng RNA在37℃温育1h，使用琼脂糖凝胶电泳检测超过90%的RNA仍保持完整。
【注意事项】
1. 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性；
2. 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂（例如甘油、盐）与底物溶液中的污染物（例如盐、EDTA或乙醇等）相同，反应体积越小，酶切反应抑制效应越强。
