
【储存条件】 2×Direct PCR Mix,请置于-20˚C保存,其余试剂常温或4℃保存。
【产品简介】 本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐抑制物的2×Direct PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。适用于简单非多糖、多酚植物。
【产品组分】

【适用范围】 适用于对非多糖、多酚类植物叶片、种子等进行直接扩增。
【操作示例】
1.配制即用裂解液:按照5 μL Stock A + 10 μL Stock B +85 μL ddH2O = 100 μL比例配制成即用裂解液。每个样品需要50 μL即用裂解液,具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可;
2.植物样品切成20mm²的大小,放入0.2 mL PCR薄壁管中(没有PCR仪器者也可以用0.5 mL离心管),加入50 μL裂解液,确保样品全部浸入溶液中。
3.98℃裂解30 min(建议PCR仪上操作),根据情况裂解时间可以在15 min-1 h内调整;
4.取出离心管迅速放冰上,加入50 μL Buffer N混匀,即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存;
5.PCR扩增。取1 μL上清用于PCR反应,参考PCR体系及扩增程序如下:

【注意事项】
1.模板加入量:小于PCR反应体系的5%,过多会严重抑制PCR反应,推荐加入1 μL模板。
2.引物终浓度:0.2-0.25 μM可以得到较好结果。反应性能较差时,可在0.1-0.5 μM范围内调整引物浓度。
3.反应体系:推荐使用20 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
4.如果样品多酚多糖较多,扩增效果不理想,可在20 μL PCR反应体系加入2μL 10% PVP40改善效果。