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快速直接PCR试剂盒

本产品包含的SuperFast直接扩增裂解液可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器。
本产品包含高纯度Fast HIFI Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。Fast HIFI Taq DNA聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR产物的3’端附有一个突出的碱基"A",纯化后可直接用于TA载体克隆。本产品有含蓝色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。

快速直接PCR试剂盒

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产品详情 产品参数

    产品参数
  • 货号RG002014、RG002015、RG002016


【储存条件】 长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少6个月。


【产品简介】 

本产品包含的SuperFast直接扩增裂解液可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器。

本产品包含高纯度Fast HIFI Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。Fast HIFI Taq DNA聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR产物的3’端附有一个突出的碱基'A',纯化后可直接用于TA载体克隆。本产品有含蓝色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。


【产品组分】


【适用范围】 1.基因检测:本产品批次间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。2.用于从复杂模板如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。


【所需试剂】 使用者仅需准备PCR反应的模板、引物等。


【样本处理】

样本研磨小妙招:

1.将黄枪头用火灼烧融化成自制的“研磨杵”,在0.2 mL PCR管中研磨幼嫩组织或者昆虫;

2.成熟叶片或较大组织,加入50-100 μL裂解液在1.5 mL离心管中用研磨杵旋转挤压破壁;

3.种子或很厚样本(杨树叶片)需要先用液氮研磨,再取少数样本加入50-100 μL裂解液。

样本裂解:

1.菌液样品

将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性菌、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:10 混合(1 μL菌液:10 μL裂解液),直接沸水浴5分钟,短暂离心后取1 μL作为后续PCR模板。

2.平板上的菌落

用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 μL裂解液,吹吸混匀,95℃或沸水浴5分钟,12000 rpm离心1-2分钟,取1 μL作为后续PCR模板。

3.血液或其他液体样品(尿液、组织液或者各种体液)

以液体样本和裂解液体积比1:10混合(1 μL样本:10 μL裂解液),95℃或煮沸5分钟,12000 rpm离心1-2分钟,取1 μL作为后续PCR模板。

4.植物组织样品(幼嫩叶片、果实、种子、根组织等)

20 μL裂解液加入2mm²样本,将固体样品尽量研磨,煮沸10分钟,(棉花、烟草、杨树、番茄、柑橘等多糖多酚类样本,等上述样本冷却到室温加入20 μL氯仿,Vortex 10秒),12000 rpm离心2分钟,取1-2 μL作为后续 PCR模板。

5.动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)

20 μL裂解液加入2mm²样本,将固体样品尽量研磨,煮沸30分钟,(鼠尾、鼠趾等富含胶质样本,等上述样本冷却到室温加入20 μL氯仿,Vortex 10秒) 12000 rpm离心1-2分钟,取1-2 μL作为后续PCR模板。

6.土壤等环境组织样品

20 μL裂解液加入2mm²样本,将固体样品尽量研磨,95℃或煮沸30分钟,12000 rpm离心1-2分钟,取1-2 μL作为后续PCR模板。


【操作示例】


【注意事项】

1.直接扩增裂解液应室温保存,如冷冻或冷藏状态下取出,使用前查看是否有沉淀,一定要确保裂解液没有沉淀,否则应在 37℃水浴中重新溶解后摇匀使用。

2.请摸索出最适合您实验的裂解液和样本的比例关系,样本太多会超出裂解液的处理上限,导致裂解不完全;样本太少会造成模板浓度过低,导致PCR失败。建议10-20 μL裂解液加入1-2mm²(1-2平方毫米)大小样本为宜!

3.较难处理的组织可以用50-100 μL裂解液,务必采用适合的研磨方式来破碎组织,让细胞充分破裂释放DNA(可以通过看裂解液的颜色来判断是否充分破碎)。

4.裂解液处理后的用做PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10。

5.剩余的裂解产物放在-20℃保存一个月以上,以备后续再次检测。再次取出做模板时,务必12000 rpm离心1-2分钟才能取上清1-2 μL做PCR模板。

6.对于多糖多酚的植物样本(比如棉花、烟草、番茄、杨树和一些海藻)和动物鼠尾等样本,在沸水浴冷却到室温,加入等体积的氯仿振荡处理,然后12000 rpm离心2分钟取上清,效果会有很大改善。

7.以粗提物为模板做PCR,因为模板量更少,循环数应比用CTAB提取DNA做模板PCR循环数多2-3个循环。

8.以粗提物为模板做PCR,降低扩增速度有利于得到稳定结果,建议延伸速度60 s/1kb。


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产品参数
  • 货号RG002014、RG002015、RG002016

产品详情


【储存条件】 长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。经常使用,可置于4˚C保存至少6个月。


【产品简介】 

本产品包含的SuperFast直接扩增裂解液可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器。

本产品包含高纯度Fast HIFI Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。Fast HIFI Taq DNA聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR产物的3’端附有一个突出的碱基'A',纯化后可直接用于TA载体克隆。本产品有含蓝色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。


【产品组分】


【适用范围】 1.基因检测:本产品批次间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。2.用于从复杂模板如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。


【所需试剂】 使用者仅需准备PCR反应的模板、引物等。


【样本处理】

样本研磨小妙招:

1.将黄枪头用火灼烧融化成自制的“研磨杵”,在0.2 mL PCR管中研磨幼嫩组织或者昆虫;

2.成熟叶片或较大组织,加入50-100 μL裂解液在1.5 mL离心管中用研磨杵旋转挤压破壁;

3.种子或很厚样本(杨树叶片)需要先用液氮研磨,再取少数样本加入50-100 μL裂解液。

样本裂解:

1.菌液样品

将培养至对数生长期的菌液(酵母、革兰氏阳性菌、农杆菌、放线菌培养液等)以菌液和裂解液体积比1:10 混合(1 μL菌液:10 μL裂解液),直接沸水浴5分钟,短暂离心后取1 μL作为后续PCR模板。

2.平板上的菌落

用灭菌枪头挑取少量菌体,加入10 μL裂解液,吹吸混匀,95℃或沸水浴5分钟,12000 rpm离心1-2分钟,取1 μL作为后续PCR模板。

3.血液或其他液体样品(尿液、组织液或者各种体液)

以液体样本和裂解液体积比1:10混合(1 μL样本:10 μL裂解液),95℃或煮沸5分钟,12000 rpm离心1-2分钟,取1 μL作为后续PCR模板。

4.植物组织样品(幼嫩叶片、果实、种子、根组织等)

20 μL裂解液加入2mm²样本,将固体样品尽量研磨,煮沸10分钟,(棉花、烟草、杨树、番茄、柑橘等多糖多酚类样本,等上述样本冷却到室温加入20 μL氯仿,Vortex 10秒),12000 rpm离心2分钟,取1-2 μL作为后续 PCR模板。

5.动物组织样品(鼠尾、鼠耳等组织)

20 μL裂解液加入2mm²样本,将固体样品尽量研磨,煮沸30分钟,(鼠尾、鼠趾等富含胶质样本,等上述样本冷却到室温加入20 μL氯仿,Vortex 10秒) 12000 rpm离心1-2分钟,取1-2 μL作为后续PCR模板。

6.土壤等环境组织样品

20 μL裂解液加入2mm²样本,将固体样品尽量研磨,95℃或煮沸30分钟,12000 rpm离心1-2分钟,取1-2 μL作为后续PCR模板。


【操作示例】


【注意事项】

1.直接扩增裂解液应室温保存,如冷冻或冷藏状态下取出,使用前查看是否有沉淀,一定要确保裂解液没有沉淀,否则应在 37℃水浴中重新溶解后摇匀使用。

2.请摸索出最适合您实验的裂解液和样本的比例关系,样本太多会超出裂解液的处理上限,导致裂解不完全;样本太少会造成模板浓度过低,导致PCR失败。建议10-20 μL裂解液加入1-2mm²(1-2平方毫米)大小样本为宜!

3.较难处理的组织可以用50-100 μL裂解液,务必采用适合的研磨方式来破碎组织,让细胞充分破裂释放DNA(可以通过看裂解液的颜色来判断是否充分破碎)。

4.裂解液处理后的用做PCR模板,加入的量不要超过PCR体系的1/10。

5.剩余的裂解产物放在-20℃保存一个月以上,以备后续再次检测。再次取出做模板时,务必12000 rpm离心1-2分钟才能取上清1-2 μL做PCR模板。

6.对于多糖多酚的植物样本(比如棉花、烟草、番茄、杨树和一些海藻)和动物鼠尾等样本,在沸水浴冷却到室温,加入等体积的氯仿振荡处理,然后12000 rpm离心2分钟取上清,效果会有很大改善。

7.以粗提物为模板做PCR,因为模板量更少,循环数应比用CTAB提取DNA做模板PCR循环数多2-3个循环。

8.以粗提物为模板做PCR,降低扩增速度有利于得到稳定结果,建议延伸速度60 s/1kb。


快速直接PCR试剂盒
本产品包含的SuperFast直接扩增裂解液可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁,短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板;同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解,是各种粗样品直接PCR的必备神器。
本产品包含高纯度Fast HIFI Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。Fast HIFI Taq DNA聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR产物的3’端附有一个突出的碱基"A",纯化后可直接用于TA载体克隆。本产品有含蓝色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。
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