1.确保DNA上样量充足
在进行凝胶电泳时，应保证DNA的上样量充足，并选择梳齿宽且薄的梳子，以优化DNA片段的分离效果。由于切胶回收过程中会不可避免地丢失部分DNA，因此足够的上样量是确保后续实验材料充足的关键。
2.保持切胶刀片清洁
切胶时，务必使用干净的刀片，以防止其他DNA的污染。应尽量只切割含有目标条带的凝胶区域，以减小切胶体积。同时，必须确保将条带所在的凝胶完全切下，并将切下的胶块进行细化处理，然后全部收集到离心管内，以确保回收效率。
3.充分溶解凝胶以释放DNA
在加入溶解液溶解凝胶时，应将离心管置于55℃-65℃的水浴中（具体温度需参照说明书）。同时，每隔2-3分钟取出离心管，用手轻轻甩动或放在涡旋仪上震荡混匀，以确保琼脂糖凝胶充分溶解，从而使DNA能够完全释放出来。
4.预热洗脱液以提高得率
在进行洗脱步骤前，提前将洗脱液在55℃-65℃的水浴中预热，这有助于提高DNA的回收得率，确保实验结果的准确性。
5.严格遵守操作说明中的离心和静置步骤
如果说明书中要求空柱子离心或离心后静置1-2分钟，务必严格按照操作说明执行。空柱子再次离心可以去除残留液体，而静置则有助于乙醇蒸发，避免影响DNA的纯度。
6.控制洗脱液体积以优化回收浓度
加入的洗脱液体积应适中，一般以30-50μl为宜。过多的洗脱液会导致回收的DNA浓度过低，而过少的洗脱液则可能无法完全浸润过滤膜，导致部分DNA无法洗脱。在加入洗脱液时，应快速垂直滴到膜中央，并按照说明书要求静置一段时间，以确保DNA从膜中充分析出。
7.关注A260/A280比值以评估DNA纯度
在测定DNA浓度时，应重点关注A260/A280的比值，一般以1.8-2为宜。如果回收成功且无污染，A260/A230的比值通常会在1.8以上，这是评估DNA纯度的重要指标。
8.根据胶块重量调整溶解液体积
如果切下来的胶块感觉重量超过了说明书的要求，建议进行称重确认。如果确实超过了规定重量，应按比例增加溶解胶块的溶液体积，以确保胶块能够彻底溶解，避免影响DNA的回收效率和纯度。
